特异性DcR3-siRNA对肝细胞癌生物学特性的影响
苏传丽(广西医科大学病理学教研室,南宁,530021广西医科大学第一附属医院病理科,南宁,530021);罗殿中(广西医科大学病理学教研室,南宁,530021广西医科大学第一附属医院病理科,南宁,530021);陈罡(广西医科大学病理学教研室,南宁,530021广西医科大学第一附属医院病理科,南宁,530021);覃新干(广西医科大学第一附属医院胃肠腺体外科,南宁,530021);
摘要
目的 探讨特异性诱捕受体3(decoy receptor 3,DcR3)的siRNA对HepG2细胞生物学特性的影响.方法 设计并合成针对DcR3的siRNA,用脂质体转染HepG2细胞,通过半定量RT-PCR及免疫细胞化学法检测其对DcR3表达的抑制作用;应用MTT法、流式细胞术、划痕实验检测转染后HepG2细胞增殖、凋亡及迁移能力的变化.结果特异性DcR3-siRNA能抑制DcR3 mRNA和蛋白表达(P<0.05);MTT实验结果:转染后24、48和72 h特异性DcR3-siRNA转染组细胞吸光度值低于空白对照组、脂质体转染组及非特异性siRNA转染组(P<0.001),特异性DcR3-siRNA转染组细胞的增殖抑制率在24、48和72 h分别为20.71%、35.00%和34.04%;转染后72 h,特异性DcR3-siRNA转染组细胞与空白对照组、脂质体转染组及非特异性siRNA转染组细胞相比,G1期细胞比例增多而G2/M期细胞比例减少(P<0.01);流式细胞仪检测细胞凋亡结果显示,特异性DcR3-siRNA转染组细胞凋亡率(22.97%±2.10%)高于空白对照组(1.17%±0.32%)、脂质体转染组(1.44%±0.43%)及非特异性siRNA转染组(1.22%±0.40%)(P<0.001);划痕实验结果显示,转染后24、48和72 h,特异性DcR3-siRNA转染组细胞的相对迁移率均低于空白对照组、脂质体转染组及非特异性siRNA转染组细胞(P<0.001).结论 特异性DcR3-siRNA能有效抑制肝癌细胞系HepG2的DcR3表达,诱导细胞凋亡,并能抑制HepG2细胞的增殖和迁移能力.
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