小RNA干扰沉默VEGF基因对结肠癌HT29细胞系增殖和凋亡的影响

张晟(安徽医科大学病理学教研室,合肥230032安徽医学高等专科学校生理教研室,合肥230600);陆娜娜(安徽医科大学病理学教研室,合肥,230032);尹玉(安徽医科大学病理学教研室,合肥,230032);曹立宇(安徽医科大学病理学教研室,合肥,230032);

阅读：335 临床与实验病理学杂志； 2013年29卷3

摘要

目的探讨血管内皮细胞生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)基因在调控人大肠癌(colorectal carcinoma,CRC)细胞HT29增殖及凋亡中的作用.方法以脂质体Lip 2000为载体,用针对VEGF特异靶点的siRNA转染人CRC细胞HT29后,应用免疫细胞化学SP法和Western blot法检测VEGF蛋白表达变化；MTT法检测细胞增殖；流式细胞技术检测细胞凋亡.结果免疫细胞化学示:VEGF在正常组、脂质体组及阴性错配组细胞质中均呈强阳性；在VEGF-siRNA组细胞质呈弱阳性.Western blot结果示:VEGF-siRNA组细胞的蛋白条带亮度明显低于正常组、脂质体组和阴性错配组；MTT检测结果发现,与阴性错配组相比,VEGF-siRNA组细胞生长出现明显抑制(P＜0.05),且不同时段(24、48、72 h)肿瘤细胞增殖抑制率之间差异有显著性(P＜0.05)；流式细胞术检测VEGF-siRNA组细胞凋亡比例明显高于正常组及阴性错配组(P＜0.05).结论 VEGF基因参与调控制CRC细胞HT29的增殖和凋亡,VEGF有望成为CRC基因治疗的新靶点.

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