PTEN基因的克隆及其在HepG2细胞中的表达

吴园园(大连市中心医院中心实验室,大连,116033);张利(大连市中心医院中心实验室,大连,116033);肖继贤(宝生物工程(大连)有限公司制造四部,大连,116600);朱晓钰(大连市中心医院中心实验室,大连,116033);纪军(大连市中心医院中心实验室,大连,116033);孙喜琢(大连市中心医院中心实验室,大连,116033);张众(大连医科大学临床病理中心,大连,116027);

阅读：244 临床与实验病理学杂志； 2006年22卷4

摘要

目的克隆人抑癌基因PTEN全长cDNA,构建其真核表达载体并检测其在人肝癌细胞HepG2中的表达.方法采用RT-PCR法从人正常肝组织中扩增PTEN全长cDNA,将之与pMD18-T Simple Vector连接、测序, 获得PTEN基因.将该基因与pcDNA3.1(+)载体连接,构建pcDNA3.1-PTEN真核表达载体.用该载体转染HepG2细胞,RT-PCR检测PTEN的表达. 结果酶切和测序证实PTEN基因克隆和真核表达载体构建成功.HepG2-PTEN细胞中PTEN mRNA的表达显著高于未转染的HepG2细胞.结论人抑癌基因PTEN在人肝癌细胞系HepG2细胞中能够高效、稳定地表达,为其在肝癌基因治疗研究中的应用奠定了基础.

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