Ryanodine受体2基因沉默对大鼠心肌细胞缺血再灌注损伤的影响

郭竹英(海交通大学医学院附属第三人民医院实验中心,201900);矫强(海交通大学医学院附属第三人民医院实验中心,201900);王世婷(海交通大学医学院附属第三人民医院实验中心,201900);徐芒华(海交通大学医学院附属第三人民医院实验中心,201900);高丰厚(海交通大学医学院附属第三人民医院实验中心,201900);

阅读：302 中华病理学杂志； 2008年37卷11

摘要

目的观察应用RNA干扰阻断Ryanodine受体2(RyR2)合成是否对心肌缺血再灌注(I/R)损伤有保护作用.方法分离培养大鼠原代心肌细胞并建立I/R模型.应用RNA干扰技术阻断RyR2表达,分别检测对照组、RNA干扰组、I/R模型组、RNA干扰+IYR模型组细胞凋亡率、RyR2 mRNA、细胞内钙离子浓度、培养上清中乳酸脱氢酶(LDH)水平和线粒体膜电位变化.结果与对照组相比.I/R组细胞发生明显凋亡和损伤(60.1%比5.5%.P<0.05),细胞内钙离子浓度显著上升(平均荧光强度21.2比7.6,P<0.05),RyR2表达变化不明显(20.1比22.7,P>0.05),线粒体膜电位显著下降(平均荧光强度37.2比85.1,P<0.05).相对于I/R组,siRNA干预组细胞RyR2表达显著下降(6.8比20.1,P<0.05),LDH水平、凋亡率、细胞内钙离子浓度均有明显下降(上清LDH为48 IU/L比125 IU/L,Annexin V阳性细胞31.2%比60.1%,钙离子浓度为平均荧光强度8.6比21.2,均P<0.05),线粒体膜电位显著升高(55.8比37.2,P<0.05).结论在大鼠原代心肌细胞中RyR2基因沉默对心肌I/R损伤有一定保护作用.

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