分化抑制蛋白1在小鼠树突状细胞肉瘤细胞分化中的作用

卞晓翠(100005,中国医学科学院基础医学研究所北京协和医学院基础学院病理室);刘玉琴(100005,中国医学科学院基础医学研究所北京协和医学院基础学院病理室);顾蓓(100005,中国医学科学院基础医学研究所北京协和医学院基础学院病理室);冯海凉(100005,中国医学科学院基础医学研究所北京协和医学院基础学院病理室);

阅读：361 中华病理学杂志； 2008年37卷5

摘要

目的研究降低分化抑制蛋白1(Id.1)的表达在树突状细胞肉瘤(DCS)细胞分化中的作用.方法通过RNA干扰技术来降低DCS细胞株中Id-l蛋白的表达,Western blot和real.timePCR分别检测该蛋白在蛋白水平和mRNA水平L的变化;倒置显微镜下观察降低Id.1蛋白表达后DCS细胞形态的变化;Casy细胞计数分析仪检测细胞大小的分布情况;流式细胞仪检测细胞周期的变化.通过Western blot和免疫组织化学检测树突状细胞的分化标志如Id-2、CD86、CDllc、MHC II的变化.生长曲线及四甲基偶氮唑盐(MTY)法检测DCS细胞的增殖情况的变化;通过TransweH和克隆形成率测定分别观察降低Id-1蛋白前后细胞侵袭、成瘤能力的变化.以不加siRNA的空白组和无关对照siRNA作阴性对照,以诱导分化剂丁酸钠作为阳性对照.结果降低Id-1蛋白表达后DCS细胞分枝增多,细胞体积明显增大,核质比下降,G0/G1期细胞增多,S期细胞减少(P<0.01),树突状细胞分化标志Id-2、CD86等表达上调,细胞增殖受到抑制,侵袭、成瘤能力减弱(P<0.01).结论通过RNA干扰技术降低Id-1基因的表达,可以促进恶性实体肿瘤细胞的分化,降低恶性程度.

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