临床常规病理检测的今天,应用免疫组织化学方法在完整的福尔马林固定、石蜡包埋组织中检测蛋白是有局限性的,因为免疫组织化学方法是半定量的。本研究推出一项新的、可靠的定量免疫组织化学方法:qIHC,此方法是建立在新的扩增系统上,能在福尔马林固定、石蜡包埋的组织中通过计数点的多少使蛋白质量化。qIHC技术与标准的免疫组织化学结合,用标准的亮视野显微镜术和图像分析进行评估。本目的是研究qIHC方法的分析性能。qIHC需要在分析性的定量检测下,结合ELISA和流式细胞术进行定量蛋白的检测。在5种不同的细胞系中检测人类表皮生长因子受体2(HER2)蛋白的表达,HER2在这些细胞系中免疫组织化学强阳性(IHC 3+)。我们对此方法的重复性、再现性、稳定性、线性关系、动态范围、敏感性和定量局限进行评估。再现性和稳定性应用商业性免疫组织化学平台,在实验室已建立的类似的日常工作中进行评估。此外,qIHC与44个乳腺癌样本中标准的HER2免疫组织化学有关。在所有评估的参数中,qIHC性能比得上或优于参考方法。而且, qIHC比免疫组织化学和ELISA 的参考方法有更低的检测局限性,并证实能在较大动态范围内精确检测HER2。总之,结果显示 qIHC方法能在福尔马林固定、石蜡包埋的细胞系和组织中对蛋白表达的检测提供灵敏定量的、精确的和稳定的分析。
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